Simone
聚合酶链反应简称PCR，是 以DNA半保留复制机制为基础 ，发展出的 体外酶促合成、扩增特定核酸片段的一种方法 。
PCR反应需要以双链DNA作为模板，因此最初的PCR反应用于检测目标样本的基因组中是否存在特定的目的片段，但是这种以基因组DNA为模板的PCR反应 无法检测目的基因是否在样本中表达 ，此外由于 真核生物的基因中存在内含子，直接通过基因组DNA进行PCR也很难确定样本中是否存在目的基因 ，针对这一问题，发展出了 逆转录PCR 的技术。
逆转录PCR (reverse transcription PCR，RT-PCR) 是 以mRNA为模板，在逆转录酶作用下合成cDNA ，之后再进行PCR的过程。
1996年，实时荧光定量PCR (real-time quantitative polymerase chain reaction，Real-time qPCR) 由美国Applied Biosystems公司首先推出，所谓Real-time qPCR是指在 PCR反应中加入荧光基团 ，通过连续监测荧光信号出现的先后顺序以及 信号强弱的变化 ，即时分析 目的基因的初始量 ，该技术的发明实现了 PCR从定性到定量的飞跃 。
荧光定量PCR分为 绝对定量和相对定量 两种：
绝对定量是用已知的标准曲线推算出某个样品中目的基因的拷贝数和浓度。
此方法所用 目的基因标准品的浓度是已知的 ，该标准品中目的基因的量可以被精确测定，因此可将标准品 稀释成不同浓度 的样品，并作为模板来进行Real-time qPCR反应， 以标准品中目的基因拷贝数的对数作为横坐标，以Ct值作为纵坐标，可绘制出一条标准曲线 。
对未知样品进行定量时，根据未知样品的Ct值，即可从标准曲线方程中推算出样品中目的基因的拷贝数。
相对定量得到的结果为特定样本中目的基因相对于另一参照样本的量的变化 。
在某些不需要对基因进行绝对定量，只需要确定基因相对表达差异的情况下， 如某样品在经过某种处理后目的基因表达量是增加了还是减少了 ，用相对定量的方法就可以得到结果， 相对定量是一种更普遍、更简单的方法 。
其它PCR技术：
原位、反转录、巢式、锚定、竞争性、复合、不对称、定量、重组。这些都是PCR技术的延伸应用。
Inverse pcr大法好，鉴定整合位点，基因定位，真方便
当前核酸分子的定量有三种方法，光度法基于核酸分子的吸光度来定量； 实时荧光定量PCR （Real Time PCR）基于 Ct值 ，Ct值就是指可以检测到荧光值对应的循环数；我们实验室用BIOGHC Elitefast SYBR Kit检测DNA,熔解曲线是为了验证扩增产物特异性的，要是熔解曲线是单峰说明产物只有一条，结果较好
广义说，pcr技术就一种，如果说比较有特色的可以算上荧光定量（荧光定量多了一个实时监控而已），其他的都是在这个基础上做调整。细说就多了去了，不同的调整方向，可以有不同的分类:如果没弄清楚原理，光名字就能把人绕晕
